常見問題
如何優(yōu)化微球在試條上的釋放？
微球在層析試條上的釋放問題目前是業(yè)界非常頭痛的問題，因?yàn)椴还苁侨槟z微球還是膠體金微球，都非常難徹底的從乳膠墊或者金標(biāo)墊上完全、同步的釋放。但是在這些乳膠墊配方優(yōu)化當(dāng)中，還是有一些規(guī)律可以尋找。美牛生物建議你從最簡(jiǎn)單的配方進(jìn)行優(yōu)化，首先從緩沖液與糖類著手，然后從蛋白類，最后是表面活性劑以及其他輔料。不建議采用專利、文獻(xiàn)資料的配方著手，因?yàn)檫@樣反而會(huì)耽擱你的優(yōu)化時(shí)間。其次也需要考慮乳膠墊的材料。兩個(gè)方面相互結(jié)合會(huì)大大提高微球的釋放能力。
不同的化學(xué)發(fā)光項(xiàng)目該選擇什么類型的磁珠？
化學(xué)發(fā)光磁珠選擇是一個(gè)比較難的問題，研發(fā)項(xiàng)目太多，有標(biāo)記抗原、有標(biāo)記抗體甚至有標(biāo)記糖類物質(zhì)，所以很難采用一種微球解決所有問題。但是不管怎么復(fù)雜，先根據(jù)公司的實(shí)際情況來決定，如果需要項(xiàng)目研究快，那就選SA磁珠，但是后續(xù)試劑成本相對(duì)會(huì)高一點(diǎn)，如果需要快速的標(biāo)準(zhǔn)化操作，那選擇Tosyl磁珠、環(huán)氧基磁珠以及預(yù)活化磁珠都是可以的，如果自己能力比較強(qiáng)，對(duì)標(biāo)記技術(shù)挺熟悉，那選擇性價(jià)比最高的羧基磁珠也挺好的。另外，還需要考慮抗原或者抗體的特性，因?yàn)橛行┛乖蛘呖贵w實(shí)在是非常難標(biāo)記的，他們與微球的結(jié)合能力很差或者微球空間位阻限制了抗體的性能。因此需要根據(jù)多個(gè)因素來綜合考慮選用何種磁珠更合適。
優(yōu)質(zhì)化學(xué)發(fā)光磁珠的特征?
優(yōu)質(zhì)的化學(xué)發(fā)光磁珠的特性主要是：1）單分散性；2）超順磁性，也就是磁吸后磁珠不成線；3）磁性強(qiáng)，應(yīng)當(dāng)在20S內(nèi)磁吸完成；4）無磁殘，磁吸后溶液澄清透明；5）粒徑均一，偏差在5%以內(nèi)；6）偶連抗體能力強(qiáng)，并且保障抗體不脫落；7）非特異性吸附非常小，這個(gè)相當(dāng)關(guān)鍵，因?yàn)檫@個(gè)是影響信噪比的關(guān)鍵所在；8）磁珠不板結(jié)，分散容易，同時(shí)在溶液中懸浮性比較好; 9）磁珠耐受有機(jī)溶劑以及pH值在4-12之間溶液等；10）磁珠偶連蛋白后，偶連蛋白的性能穩(wěn)定。美牛磁珠都能完全滿足上述要求，是您不錯(cuò)的選擇。
層析乳膠微球（如時(shí)間分辨微球、彩色微球等）使用到最后剩下的一些溶液怎么處理？
很多客戶咨詢層析乳膠微球使用到最后剩下的溶液怎么處理，這個(gè)確實(shí)是一個(gè)比較難處理的問題，因?yàn)樽詈蟮娜芤和泻芏嗟娜槟z顆粒成團(tuán)了（管口或者管壁微球干燥后掉落進(jìn)去的），這些顆粒嚴(yán)重干擾了正常標(biāo)記處理流程，導(dǎo)致最后結(jié)果不理想。如果丟棄，那損耗其實(shí)比較大，因此比較難處理。那如何解決這個(gè)問題，我的建議是先將管中的球水浴超聲分散，然后采用2000-3000轉(zhuǎn)/分鐘的離心機(jī)離心1-2分鐘，然后取出溶液，再稀釋10倍，最后用探頭式細(xì)胞破碎儀處理，直到微球全部分散均勻。
乳膠微球（層析乳膠微球、比濁乳膠微球）的保存條件？
乳膠微球的保存條件是根據(jù)乳膠微球的性質(zhì)來決定，如時(shí)間分辨微球是需要保存在避光環(huán)境的，白色乳膠微球就不需要避光保存，避光環(huán)境也并不是需要時(shí)時(shí)刻刻都避光，其實(shí)微球沒有這樣脆弱，1-2小時(shí)不避光對(duì)時(shí)間分辨微球其實(shí)影響并不大。另外就是溫度的影響，微球在4-40℃范圍內(nèi)長(zhǎng)期保存其實(shí)是沒有太多影響的，為什么都建議在2-8℃保存，這個(gè)主要是為了抑制細(xì)菌的滋生。微球最怕的是凍融，裸球經(jīng)過凍融后，是非常難恢復(fù)的，會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的團(tuán)聚問題。
如何選擇合適的熒光微球做定量層析？
目前，市場(chǎng)上的熒光微球有很多種，根據(jù)熒光物質(zhì)的不同，可以分為時(shí)間分辨熒光微球、普通熒光微球（紅色熒光微球、粉紅色熒光微球），根據(jù)熒光微球制備工藝不同，可以分為熒光染料包裹微球、染色熒光微球、熒光物質(zhì)交聯(lián)在微球表面的微球。根據(jù)熒光微球大小分可以分為1微米級(jí)以上、0.1微米級(jí)以上、0.1微米級(jí)以下等級(jí)別。 ? 怎么樣的熒光微球適合做熒光定量層析，這個(gè)問題需要從以下幾個(gè)方面需要考慮： 1）、熒光微球性噪比高，因?yàn)橹挥袉蝹€(gè)微球的熒光放大效應(yīng)高，才能使定量層析試條的靈敏度高。 2）、熒光穩(wěn)定。這個(gè)需要從幾個(gè)方面來討論： ? （1）?微球中熒光染料不能夠在微球加工、處理過程中泄露。 ? （2）熒光微球懸浮在PH值4-10之間的溶液中，微球的熒光強(qiáng)度不會(huì)發(fā)生變化。 ? （3）將熒光微球固定在層析試條上，做成儀器的標(biāo)準(zhǔn)色卡后，標(biāo)準(zhǔn)色卡的熒光強(qiáng)度不隨試條的放置時(shí)間、溫度、測(cè)試次數(shù)、激發(fā)光強(qiáng)度等因素的影響而發(fā)生變化。 ? （4）微球在水溶液中長(zhǎng)期放置，熒光強(qiáng)度不會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。 3）微球的均一性。對(duì)于層析試條來說，由于NC膜的孔徑并不是均一的，如果微球不均勻，那就會(huì)導(dǎo)致微球在膜上流動(dòng)更加不均一，從而導(dǎo)致試條的檢測(cè)結(jié)果CV差。因此需要微球均一性很好。 4）、微球大小，根據(jù)目前市面上常用的NC膜的孔徑大小，熒光微球的最佳大小在200nm-500nm之間，微球太小，單個(gè)微球包裹的熒光染料不多，從而導(dǎo)致信噪比不高。微球太大，微球在NC膜上的流動(dòng)速度會(huì)非常慢。試條背景熒光高，試條檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)。因此在200nm-500nm之間，其中最優(yōu)是在300nm左右。 ?? 美牛生物制備的微球完全能夠滿足上面的應(yīng)用要求，單個(gè)微球的熒光強(qiáng)度非常高，熒光非常穩(wěn)定，微球PDI系數(shù)可以控制在0.03以下，同時(shí)熒光微球的每批生產(chǎn)量可以達(dá)到5L以上左右。批間熒光強(qiáng)度非常穩(wěn)定，批間微球平均粒徑可以控制在15nm以內(nèi)。
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